Цена: 2 970,00 RUB

Можете да добавите артикул в количката си, като посочите количеството

Производител: Оболенск

Държава: Русия

единица единица: кг

Вид опаковка: полиетиленов буркан

Артикул: O9

Описание

Хранителна среда Levin-GRM с еозин метиленово синьо за изолиране на патогенни и условно патогенни ентеробактерии от тестовия материал, тяхната диференциация на базата на ферментация на лактоза. Върху средата могат да се изолират и коагулазо-положителни стафилококи. Еозин и метиленово синьо осигуряват селективни свойства. Под формата на сух прах, опаковка от 250 g е достатъчна за приготвяне на 6,6 литра твърда агарна среда

Диференциално диагностична селективна среда, принципът на действие се основава на способността на някои бактерии да ферментират лактоза с образуването на продукти, които изместват рН към киселата страна и в резултат на това промяна в цвета на комплекс от индикатори, които оцветете колонии от киселинно образуващи бактерии в тъмно лилав цвят. В резултат на култивирането се получава ясна диференциация под формата на изолирани единични колонии: лактозоотрицателните образуват прозрачни или полупрозрачни безцветни колонии с възможна лека пигментация, например Staphylococcus aureus, Shigella flexneri. Лактоза-позитивните enterobacteriaceae произвеждат непрозрачни светлолилави до виолетови цветове със или без зеленикав метален блясък, особено в E. coli

Състав на средата: панкреатичен хидролизат от рибно брашно, екстракт от дрожди, лактоза, динатриев фосфат, натриев хлорид, еозин-Н, метиленово синьо, агар.
Под формата на хомогенен сух, лесно разтворим прах със светъл лилав цвят.
Приготвената среда е прозрачна, от светло лилаво до червеникаво-кафяво.
Киселинност на средата: при 25°C има рН 7,2 ± 0,2.
Приготвената среда може да се използва през първите три дни при температура на съхранение от +2...8°C на тъмно място.
Форма на освобождаване: сух прах в полиетиленови буркани от 250 g.
Условия за съхранение: в херметически затворени опаковки на сухо и защитено от светлина място при температура от +2...30°C.
Срок на годност - 2 години от датата на производство, посочена върху опаковката.
Удостоверение за регистрация No FSR 2008/03063

Levina-GRM Obolensk Хранителна среда с еозин-метиленово синьо за изолиране и диференциация на патогенни и условно патогенни ентеробактерии, както и за изолиране на стафилококи, суха.

Цена за опаковка 0,25 кг

ИНСТРУКЦИИ за използване на хранителна среда с еозин-метиленово синьо сухо - Levin Medium-GRM Obolensk

Средата Levin-GRM Obolensk е предназначена за бактериологични изследвания в санитарната и клиничната микробиология с цел изолиране и диференциране на патогенни и условно патогенни ентеробактерии, както и за изолиране на стафилококи.

Levin-GRM Obolensk среда е фин, хигроскопичен, светлочувствителен прах със светъл лилав цвят.

Предлага се в полиетиленови кутии от 250 гр.

2.1. ПРИНЦИП НА ДЕЙСТВИЕ

Наличието на еозин и метиленово синьо в средата му придава селективни свойства.

Диференциращата способност на средата се основава на промени в рН на средата под въздействието на киселина, образувана по време на ферментацията на лактоза от бактерии. Комплекс от индикатори в киселинната зона оцветява колониите от киселинно-образуващи бактерии в тъмно лилаво; някои колонии имат зеленикав метален блясък.

2.2. СЪЕДИНЕНИЕ

Levin-GRM Obolensk среда е смес от сухи компоненти в норма, g/l:

Средата Levin-GRM трябва да осигури растеж на тестови щамове Shigella flexneri 1a 8516 и Escherichia coli 168/59 (O111:K58) върху всички посяти петриеви панички след 18-20 часа инкубация при температура (37±1) °C, когато инокулиран при 0.1 ml микробна суспензия от култура на всеки тестов щам от разреждане 10 -7, и растеж на тестовия щам Staphylococcus aureus 209-P (ATCC 6538-P) след 48 часа инкубиране при температура от ( 37±1) °C при инокулиране в 0,1 ml микробна суспензия от култура на тестов щам от разреждане 10 -5.

Диференциращи свойства на околната среда. Хранителната среда трябва да осигури ясна диференциация на Shigella от Escherichia върху всички инокулирани блюда при засяване на 0,1 ml микробна смес от S. flexneri 1a 8516 и E. coli 168/59 (O111:K58) от разреждане 10 -6 (в съотношение 1:1) след 18-20 часа инкубация при температура (37±1) °C.

Потенциален риск от използване на хранителна среда съгласно Заповедта
Министерство на здравеопазването на Руската федерация № 4n от 6 юни 2012 г. - клас 2 а.

• Термостат осигуряващ температура 37±1 °C
• Лабораторни везни 2 класа на точност
• Автоклав
• Стъклени епруветки
• Стъклени пипети, които ви позволяват да изтегляте течности от 1 и 2 ml
• Стъклен мерителен цилиндър с вместимост 1000 мл
• Петриеви панички стерилни
• Дестилирана вода
• Колби
• Стъклени фунии

Обекти на изследване в клиничната лабораторна диагностика (кръв, жлъчка, урина, гной и др.).

Изследването се извършва в бактериологична лаборатория от медицински специалисти.

7.1. Приготвяне на среда Levin-GRM Obolensk.

Прахът в количеството, посочено на етикета за приготвяне на определена серия хранителна среда, се разбърква в 1 литър дестилирана вода, кипи 3 минути, филтрира се през марлев филтър и се стерилизира в автоклав при температура 110 ° C за 20 минути. Стерилната среда се охлажда до температура
45-50 °C, изсипете в стерилни петриеви панички на слой 5-6 mm. След втвърдяване на средата чашките се сушат при температура (37±1)°С за 40-60 минути. Приготвената среда в петриеви панички е прозрачна, от светло лилаво до червеникаво-кафяво.

Стерилната среда може да се използва в продължение на 3 дни, ако се съхранява при 2-8 C.

7.2. Вземането, инокулирането на заразен материал и записването на резултатите се извършват в съответствие с „Ръководство за микробиологична диагностика на заболявания, причинени от ентеробактерии“ (М., 1984) и заповедта на Министерството на здравеопазването на СССР от 22 април 1985 г. № 535 „Относно унифицирането на микробиологичните (бактериологични) методи за изследване, използвани в клиничните диагностични лаборатории на лечебните заведения.“

7.3. Тестовият материал внимателно се втрива върху цялата повърхност на средата със стерилна шпатула. Инкубирайте при температура (37±1) °C за 46-48 часа.

След 18-20 часа инкубация при температура (37±1) °C, моделът на растеж на културите от S. flexneri 1a 8516 и E.coli 168/59 (O111:K58) и след 46-48 часа моделите на растеж на културата на S. aureus 209 се вземат под внимание визуално -P (ATCC 6538-P).

Колониите от S.flexneri 1a 8516 трябва да са кръгли, прозрачни, безцветни или леко розови, с диаметър 1,0-1,5 mm.

Колониите от Е. coli 168/59 (O111:K58) трябва да са кръгли, тъмновиолетови на цвят със зелен метален блясък (може да има отделни колонии без метален блясък), с диаметър 1,5-2,0 mm.

Колониите от S. aureus 209-P (ATCC 6538-P) трябва да са кръгли, безцветни или светло лилави с тъмен център, до 1,0 mm в диаметър.

Изхвърлянето на серия от среда Levina-GRM Obolensk с изтекъл срок на годност се извършва съгласно
SanPiN 2.1.7.2790-10 като медицински отпадъци, принадлежащи към клас „А“ - епидемиологично безопасни отпадъци.

Унищожаването на средата Levin-GRM след биологичен контрол се извършва съгласно SanPiN 2.1.7.2790-10 като медицински отпадъци, принадлежащи към клас "B" със задължителна предварителна неутрализация чрез автоклавиране в продължение на 2 часа при температура (133±1) ˚ В.

Третирането на медицински отпадъци трябва да се извършва в съответствие със схемата, приета в конкретна организация, извършваща медицински и (или) фармацевтични дейности. Тази схема е разработена в съответствие с изискванията на горните санитарни правила и одобрена от ръководителя на организацията.

Средата на Рапопорте среда за обогатяване и среда за диференциална диагностика. В нея съединениевключва: жлъчен бульон 10%, 2% глюкоза, индикатор (киселинен фуксин, обезцветен с алкали; безцветен в алкална среда, червен в кисела среда). Цел:за натрупване на тиф-паратифни бактерии при инокулиране на кръвта на пациента, както и за приблизителна диференциация на тиф-паратифни бактерии. Принцип d:с растежа на тиф-паратифните бактерии поради ферментация на глюкоза се появява дифузна мътност и зачервяване на средата. За паратифните бактерии, за разлика от тифните бактерии, наличието на газ в поплавъка.

Ендо средно– диференциална диагностика. Съединение: MPA, лактоза, индикатор – основен фуксин, обезцветен с натриев сулфит. Цел:за пресяване на тестовия материал с цел получаване на изолирани колонии. Принцип d-iсе основава на способността на някои микроорганизми да разграждат или да не разграждат лактозата (салмонелата не се разлага и образува безцветни колонии).

Сряда Левине слабо селективен и диференциално диагностичен. В нея състав MPA, тактоза, индикатори: еозин и метиленово синьо, калиев хидроген фосфат. За целта и принципа вижте Endo среда.

Среден Ръсел Съединение: MPA, лактоза 1%, глюкоза 0,1%, индикатор (воден разтвор на синьо и розолова киселина; розово в алкална среда, синьо в кисела среда). Цел:за скрининг на „подозрителни“ колонии, за да се изолират чисти култури и да се определи тяхната ензимна активност спрямо глюкоза и лактоза. Принцип d:

Среда на Клиглер– комбинирана, диференциално диагностична. Съединение: MPA, лактоза 1%, глюкоза 0,1%, натриев тиосулфат, железен II сулфат, индикатор - фенолово червено (в алкална среда - червено, в кисела среда - жълто). Цел:за скрининг на „подозрителни“ колонии с цел идентифициране на чисти култури и определяне на тяхната ензимна активност спрямо образуването на глюкоза, лактоза и H2S. Принцип d:ентеробактериите, които имат ензима тиосулфат редуктаза, редуцират тиосулфата до сулфит и се отделя сероводород, който реагира с железен сулфат - в резултат на което се образува черен железен сулфид.

Серологична идентификация на изолирана чиста култура с помощта на адсорбирани монорецепторни O- и H-аглутиниращи Salmonella серуми. Серологичната идентификация се извършва в реакция на аглутинация върху стек с аглутиниращи адсорбирани Salmonella O- и H-серуми; 2 вида: монорецепторни и поливалентни, те се получават от специфични имунни серуми по метода на адсорбция на антитела по Кастелани.

Серологичната идентификация протича последователно на 3 етапа:

1) Установяване на принадлежността на културата към серогрупи A, B, C, D, E от рода Salmonella. В този случай се използва поливалентен О-серум, съдържащ антитела срещу антигенни рецептори 2, 3, 4, 7, 9, 10. Монорецепторни О-серуми се използват срещу редки серогрупи. При диагностициране на паратиф А и В и коремен тиф можете да използвате смес от О-серуми, съдържащи антитела към рецептори 2, 4, 9.

2) Ако резултатът е положителен, за да се определи дали тестовата култура принадлежи към определена серогрупа, се извършва тест за аглутинация отделно с всеки монорецепторен О-серум, включен в поливалентния серум: рецептор 2 принадлежи към серогрупа А, рецептор 4 към серогрупа В , рецептор 7 към серогрупа С и др.

3) След определяне на серогрупата, ние определяме нейния вид, като използваме метода на аглутинация с адсорбирани монорецепторни Н-серуми срещу Н-антигените на 1-ва фаза на салмонела, които са част от тази серогрупа. След това се извършва аглутинация с адсорбирани Н-серуми срещу Н-антигени от 2-ра фаза и окончателно се установява антигенната формула на тест културата.

Бактериално носителство при коремен тиф. Какви серологични реакции могат да потвърдят хронично бактериално носителство? Диагностикуми, използвани за тази цел. Единственото доказателство за бактериално носителство е изолирането от носителя на култури S. typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi B, като се използват спомагателни методи: серологична реакция и алергичен кожен тест с Vi-typhin (съдържа Vi-антиген, който , при взаимодействие с Vi-антитела дава локална алергична реакция под формата на зачервяване и подуване за 20-30 минути). Положителна реакция с Vi-typhine показва, че организмът съдържа Vi-антитела и вероятно S. typhi.

Chr. бактериалното носителство се потвърждава от RNGA. В този случай се използва Vi-diagnosticum, т.к по време на образуването на носителство на тифни бактерии, проявата на Vi-антитела е типична; диагностичният титър на разтвора е 1:40.

Методи за заразяване с коремен тиф. Източник на инфекция. Заразяването с коремен тиф става само по орален път. Източник на инфекция са болни хора и бактерионосители (представляват опасност за другите няколко години след заболяването).

LEVINE WEDNESDAY (M. Levine, американски бактериолог, роден през 1889 г.; син. еозин метиленово синьо агар) - цветна селективна хранителна среда за диференциация на бактерии от семейството. Enterobacteriaceae се използва в лабораторната диагностика на дизентерия, коремен тиф, салмонелоза и други чревни инфекции. Еозин и метиленово синьо агар са предложени за първи път през 1916 г. от J. E. Holt-Harris и O. Teague по-късно, през 1918 г., съставът на средата е модифициран от Lewin.

Л.С. заедно с други плътно оцветени диференциално диагностични хранителни среди за ентеробактерии, намери широко приложение в лабораторията. практика. С негова помощ е възможно да се открие патогенна лактозо-отрицателна микрофлора в относително голям процент от случаите. Готов HP доста стабилен, не променя свойствата си на светлина или при съхранение в продължение на няколко дни; производството му не изисква прецизно определяне на концентрацията на водородни йони (pH). Влиза в състава на HP. органичните багрила селективно инхибират растежа на грам-положителни бактерии, поради което той е както среда за обогатяване, така и дава относително по-добри резултати при директно инокулиране на тестовия материал, дори ако съдържа относително малък брой патогенни бактерии.

В зависимост от качеството на отделните съставки (пептон и особено багрила), получената HP. резултатите могат да варират до известна степен, поради което при подготовката на всяка нова серия от среди е препоръчително да се използват материали от една и съща марка, което значително улеснява разпознаването на колониите.

Известни са няколко рецепти и методи за приготвяне на HP. (Ю. А. Козлов, Г. Я. Синай, О. Г. Биргер и др.). Най-широко използваният метод е този, при който основната среда, разтворите на лактозата и багрилата се приготвят отделно, подходящи за консервиране за бъдеща употреба и се смесват преди употреба.

Основната среда се състои от 10 g бактериологичен пептон, 15 g агар-агар, 2 g дикалиев фосфат (K2HPO4) и 1 литър дестилирана вода. Стерилизира се в автоклав при 1 atm за 15-20 минути, рН не се коригира.

Когато приготвяте диференциална среда, на всеки 100 ml разтопена основна среда, при непрекъснато разбъркване, добавете следните разтвори, приготвени в дестилирана вода и предварително стерилизирани с течаща пара (на части, 3 дни подред по 15-20 минути) в дадената последователност 5 ml 20% разтвор на медицинска лактоза, 2 ml 2% разтвор на алкален еозин (бактериологичен), 1,5 ml 0,5% разтвор на метиленово синьо. Приготвената среда се изсипва в панички на Петри, леко се изсушава и се използва както обикновено. Цветът на средата е синьо-виолетов.

Колонии от Escherichia coli върху L. p. малки, кръгли, с гладка лъскава повърхност, тъмносин (до черен) цвят, понякога с метален блясък. Младите колонии са мътни, непрозрачни и могат да бъдат оцветени само в центъра. Колониите от патогени на дизентерия, коремен тиф и паратиф са относително по-малки, кръгли, лъскави и прозрачни, обикновено напълно безцветни (млади) или с лек розов или синкав оттенък. Протейните колонии не произвеждат пълзящ растеж; те са малки, изолирани и оранжево-жълти на цвят. Средата променя цвета си само около колониите на Protea.

Някои автори препоръчват увеличаване на количеството на 0,5% разтвор на метиленово синьо до 2 ml на 100 ml основна среда или елиминиране на фосфатния буфер от неговия състав. Можете да приготвите средата не с пептон, а на базата на разваряване на Hottinger, при pH 7,2-7,3 с добавяне на подходящо количество агар и калиев фосфат. Използването на месна вода за приготвяне на средата е неприемливо, диференциацията на колониите в този случай е значително по-лоша.

Известен е метод за приготвяне на сух HP, който е много стабилен по качество и особено удобен за дългосрочно съхранение и при условия на експедиционна работа (N.V. Ploskirev).

Стабилно сухо HP. се произвежда от индустрията, заедно с носителя се изпращат инструкции за неговото производство и употреба. Повечето диагностични лаборатории използват висококачествени стандартни селективни сухи хранителни среди от местно производство за изолиране и диференциация на патогенни ентеробактерии - L. s., Bacto-agar F, среда на Ploskirev (виж среда на Ploskirev).

Библиография: Ръководство по микробиологична диагностика на инфекциозни заболявания, изд. К. И. Матвеева, стр. 110, М., 1973; Ръководство за микробиологични и вирусологични методи на изследване, изд. M. O. Birger, p. 58, М., 1973; Levine M. Ефектът на концентрацията на багрила върху диференциацията на чревни бактерии върху еозин-метилен-син агар, J. Bact., v. 45, стр. 471, 1943 г.

Г. П. Беликов.

Смесете сухата среда в количество от 40 g в 1 литър пречистена вода, оставете да заври и кипете, докато агарът се разтопи напълно (2-3 минути), филтрирайте през памучно-марлев филтър, изсипете в стерилни бутилки и стерилизирайте чрез автоклавиране при температура 112 ° С за 20 минути. Охладете стерилната среда до температура 45-48oC и изсипете в стерилни петриеви панички; След като агарът се втвърди, съдовете се изсушават при температура 37°C за 40-60 минути. Цветът на готовата среда трябва да бъде червеникава тухла.

Преди употреба приготвената среда може да се съхранява на тъмно място за не повече от 7 дни при температура 2-8 ° C.

Инкубирайте инокулациите на тестовите проби за 18-48 часа при температура от 37°C. Визуалният контрол на растежа се основава на наличието или отсъствието и появата на колонии. Лактоза-позитивните микроорганизми образуват непрозрачни колонии от светло лилаво до виолетово със или без метален блясък. Лактоза-отрицателните микроорганизми образуват прозрачни или полупрозрачни безцветни колонии (те могат да образуват бледорозови колонии).

Изхвърляне на сухи среди с изтекъл срок на годност и използвани готови хранителни среди - в съответствие с изискванията на SanPiN 2.1.7.728-99 Правила за събиране, съхранение и обезвреждане на отпадъци от лечебни заведения.