価格: 2,970.00 ルーブル

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メーカー: オボレンスク

国: ロシア

ユニット 単位：kg

包装の種類: ポリエチレン瓶

記事：O9

説明

試験材料から病原性および条件付き病原性腸内細菌を分離し、乳糖発酵に基づいてそれらを区別するためのエオシン メチレン ブルーを含む Levin-GRM 栄養培地。 コアグラーゼ陽性ブドウ球菌も培地から分離できます。 エオシンとメチレンブルーは選択的特性を提供します。 乾燥粉末の形態では、250 g パッケージで 6.6 リットルの高密度寒天培地を調製するのに十分です。

鑑別診断用選択培地の動作原理は、一部の細菌が乳糖を発酵させて pH を酸性側にシフトさせる産物を形成し、その結果、指示薬の複合体の色の変化を引き起こす能力に基づいています。酸生成細菌のコロニーを濃い紫色に着色します。 培養の結果、分離された単一コロニーの形で明確な区別が得られます。乳糖陰性のものは、黄色ブドウ球菌、フレクスネリ菌など、わずかな色素沈着を伴う透明または半透明の無色のコロニーを形成します。 乳糖陽性の腸内細菌科は、特に大腸菌で、緑がかった金属光沢の有無にかかわらず、不透明な薄紫色から紫色を生成します。

培地の組成：魚粉の膵臓加水分解物、酵母エキス、乳糖、リン酸二ナトリウム、塩化ナトリウム、エオシン-H、メチレンブルー、寒天。
均一な乾燥した、溶けやすい薄紫色の粉末の形です。
調製した培地は、淡い薄紫色から赤褐色まで透明です。
培地の酸性度: 25℃での pH は 7.2 ± 0.2 です。
調製した培地は、最初の 3 日間は暗所で +2 ～ 8°C の保存温度で使用できます。
放出形態: 250 g のポリエチレン瓶に入った乾燥粉末。
保管条件: +2 ～ 30°C の温度で光から保護された乾燥した場所に密封された包装で保管してください。
賞味期限 - パッケージに記載されている製造日から2年間。
登録証明書番号 FSR 2008/03063

Levina-GRM オボレンスク 病原性および条件付き病原性腸内細菌の分離と分化、ならびにブドウ球菌の分離用のエオシン-メチレンブルーを含む乾燥栄養培地。

1梱包あたりの価格 0.25kg

エオシン-メチレンブルー乾燥栄養培地の使用説明書 - Levin Medium-GRM Obolensk

Levin-GRM オボレンスク培地は、病原性および条件付き病原性腸内細菌の分離と区別、およびブドウ球菌の分離を目的とした、衛生微生物学および臨床微生物学における細菌学的研究を目的としています。

Levin-GRM Obolensk 培地は、淡いライラック色の微細で吸湿性があり、感光性の粉末です。

250gのポリエチレン缶入りです。

2.1. 動作原理

培地中にエオシンとメチレンブルーが存在すると、培地に選択性が与えられます。

培地の分別能力は、細菌による乳糖の発酵中に形成される酸の影響による培地の pH の変化に基づいています。 酸性ゾーンにおける指示薬の複合体は、酸生成細菌のコロニーを濃い紫色に着色します。一部のコロニーは緑がかった金属光沢を示します。

2.2. コンパウンド

Levin-GRM オボレンスク培地は、乾燥成分の割合 (g/l) の混合物です。

Levin-GRM 培地は、(37±1) °C の温度で 18 ～ 20 時間インキュベートした後、播種したすべてのペトリ皿上で試験菌株 Shigella flexneri 1a 8516 および Escherichia coli 168/59 (O111:K58) を確実に増殖させる必要があります。 10 -7 に希釈した各試験菌株の培養液の微生物懸濁液 0.1 ml を接種し、温度 ( 10 -5 に希釈した試験菌株培養物の微生物懸濁液 0.1 ml を接種した場合、37±1) ℃。

環境の差別化特性。 栄養培地は、S. flexneri 1a 8516 と E. coli 168/59 (O111:K58) の微生物混合物 0.1 ml を 10 -6 (in (37±1) °C の温度で 18 ～ 20 時間インキュベートした後、比率は 1:1)。

命令に従って栄養培地を使用する場合の潜在的なリスク
ロシア連邦保健省 2012 年 6 月 6 日付第 4n 号 - クラス 2 a。

• 37±1℃の温度を提供するサーモスタット
• ラボスケール 2 つの精度クラス
• オートクレーブ
• ガラス試験管
• 1 ml および 2 ml の液体を吸引できるガラス製ピペット
• 容量1000mlのガラス製メスシリンダー
• シャーレ滅菌
• 蒸留水
• フラスコ
• ガラス漏斗

臨床検査診断（血液、胆汁、尿、膿など）の研究対象。

この研究は細菌研究所で医療専門家によって行われます。

7.1. レビン-GRM オボレンスク培地の調製。

特定の一連の栄養培地を調製するためにラベルに示されている量の粉末を1リットルの蒸留水中で撹拌し、3分間煮沸し、綿ガーゼフィルターを通して濾過し、110℃の温度でオートクレーブ滅菌する。 20分間。 無菌環境はある温度まで冷却されます
45 ～ 50 °C で、滅菌ペトリ皿に 5 ～ 6 mm の層で注ぎます。 媒体が固化した後、カップを (37±1)℃の温度で 40 ～ 60 分間乾燥させます。 ペトリ皿で調製された培地は、淡い薄紫色から赤褐色まで透明です。

滅菌培地は 2 ～ 8℃ で保存すれば 3 日間使用できます。

7.2. 感染物質の採取、接種、結果の記録は、「腸内細菌によって引き起こされる疾患の微生物学的診断ガイドライン」（M.、1984年）および1985年4月22日付けのソ連保健省命令に従って行われます。 535 「医療機関の臨床診断検査室における微生物学的（細菌学的）研究方法の統一について」。

7.3. 試験材料を滅菌スパチュラで培地の表面全体に注意深くこすり付けます。 (37±1) °C の温度で 46 ～ 48 時間インキュベートします。

(37±1) °C の温度で 18 ～ 20 時間インキュベートした後の培養菌 S. flexneri 1a 8516 および E.coli 168/59 (O111:K58) の増殖パターン、および 46 ～ 48 時間後の増殖パターン黄色ブドウ球菌 209 の培養パターンは視覚的に考慮されます -P (ATCC 6538-P)。

S.flexneri 1a 8516 のコロニーは、直径 1.0 ～ 1.5 mm の円形、透明、無色またはわずかにピンク色でなければなりません。

E. coli 168/59 (O111:K58) のコロニーは、直径 1.5 ～ 2.0 mm の丸く、緑色の金属光沢のある濃い紫色でなければなりません (金属光沢のない個々のコロニーもあります)。

黄色ブドウ球菌 209-P (ATCC 6538-P) のコロニーは、直径 1.0 mm までの円形、無色または薄紫色で中心が暗色である必要があります。

保存期限が切れた一連の Levina-GRM Obolensk 培地の廃棄は、次に従って行われます。
SanPiN 2.1.7.2790-10 は、クラス「A」に属する医療廃棄物 - 疫学的に安全な廃棄物です。

生物学的制御後の Levin-GRM 環境の破壊は、クラス「B」に属する医療廃棄物として SanPiN 2.1.7.2790-10 に従って実行され、(133±1) °の温度で 2 時間オートクレーブ滅菌することによる必須の予備中和が行われます。 C.

医療廃棄物の処理は、医療および（または）製薬活動を行う特定の組織で採用されているスキームに従って実行される必要があります。 このスキームは、上記の衛生規則の要件に従って開発され、組織の長によって承認されます。

ラポポールの環境濃縮培地および鑑別診断培地です。 彼女の中で 化合物含まれるもの：胆汁汁 10%、グルコース 2%、指示薬（酸性フクシン、アルカリで変色、アルカリ性環境では無色、酸性環境では赤色）。 目的：患者の血液を接種する際の腸チフス - パラチフス菌の蓄積、および腸チフス - パラチフス菌のおおよその区別に使用されます。 原則 d:グルコース発酵による腸チフス・パラチフス菌の増殖に伴い、培地に拡散性の濁りや赤みが生じます。 パラチフス菌の場合、腸チフス菌とは対照的に、フロート内にガスが存在します。

遠藤中– 鑑別診断。 化合物: MPA、乳糖、指示薬 - 塩基性フクシン、亜硫酸ナトリウムで脱色。 目的：分離されたコロニーを得るために試験材料をふるいにかけます。 原則d-iこれは、一部の微生物が乳糖を分解するか分解しないかに基づいています（サルモネラ菌は分解せず、無色のコロニーを形成します）。

ウェンズデー・レビン弱い選択性と鑑別診断です。 彼女の中で 構成 MPA、乳糖、指示薬：エオシン、メチレンブルー、リン酸水素カリウム。 目的と原則については、Endo 環境を参照してください。

ラッセルミディアム 化合物: MPA、ラクトース 1%、グルコース 0.1%、指示薬 (水性青色およびロソール酸、アルカリ性環境ではピンク色、酸性環境では青色)。 目的：純粋培養を単離し、グルコースおよびラクトースに対する酵素活性を測定するために「疑わしい」コロニーをスクリーニングします。 原則 d:

クリグラー培地– 組み合わせた鑑別診断。 化合物: MPA、乳糖 1%、グルコース 0.1%、チオ硫酸ナトリウム、硫酸鉄 II、指示薬 - フェノールレッド (アルカリ性環境では - 赤、酸性環境では - 黄色)。 目的：純粋培養物を同定し、グルコース、ラクトースおよび H2S 形成に対する酵素活性を測定するために、「疑わしい」コロニーをスクリーニングします。 原則 d:酵素チオ硫酸レダクターゼを持つ腸内細菌は、チオ硫酸を亜硫酸に還元し、硫化水素が放出され、硫酸鉄と反応して黒色硫化鉄が形成されます。

吸着モノレセプター O および H 凝集性サルモネラ血清を使用した、単離された純粋培養物の血清学的同定。 血清学的同定は、吸着したサルモネラ菌の O 血清と H 血清を用いたスタック上の凝集反応で行われます。 単受容体と多価の 2 種類があり、カステッラーニによる抗体吸着法により特定の免疫血清から得られます。

血清学的同定は、次の 3 段階で順次行われます。

1) 培養物がサルモネラ属の血清群 A、B、C、D、E に属することの確立。 この場合、抗原受容体 2、3、4、7、9、10 に対する抗体を含む多価 O 血清が使用されます。単受容体 O 血清は、まれな血清群に対して使用されます。 パラチフス A および B および腸チフスを診断する場合、受容体 2、4、9 に対する抗体を含む O 血清の混合物を使用できます。

2) 結果が陽性の場合、試験培養物が特定の血清群に属するかどうかを決定するために、多価血清の一部である各単受容体 O 血清を用いて凝集試験が個別に実行されます。受容体 2 は血清群 A に属し、受容体 4 は血清群 A に属します。血清群 B、受容体 7 - 血清群 C など。

3) 血清群を決定した後、この血清群に含まれるサルモネラ菌の第 1 相の H 抗原に対する、吸着したモノレセプター H 血清を用いた凝集法を使用して、その種を決定します。 次に、第 2 相の H 抗原に対して吸着した H 血清を用いて凝集が行われ、最終的に試験培養物の抗原式が確立されます。

腸チフスにおける保菌。 どのような血清学的反応が慢性保菌を確認できますか? この目的で使用される診断。 細菌の保菌の唯一の証拠は、補助的な方法である血清学的反応とVi-typhinによるアレルギー性皮膚テスト（Vi-抗原が含まれており、 、Vi抗体と相互作用すると、20〜30分間発赤や腫れの形で局所的なアレルギー反応が起こります）。 Vi-チフィンに対する陽性反応は、その微生物が Vi-抗体とおそらく腸チフス菌を含んでいることを示します。

Ch. 保菌はRNGAによって確認されています。 この場合、Vi-diagnosticum が使用されます。 腸チフス菌の保菌形成中には、Vi 抗体の発現が典型的です。 この溶液の診断力価は 1:40 です。

腸チフスの感染方法。 感染源。 腸チフスの感染は経口経路でのみ起こります。 感染源は病気の人や細菌の保菌者です（病気になってから数年間は他の人に危険をもたらします）。

レバイン・水曜日（M.レバイン、アメリカの細菌学者、1889年生まれ、同義語。 エオシンメチレンブルー寒天) - 細菌科の細菌を区別するための着色された選択栄養培地。 腸内細菌科は、赤痢、腸チフス、サルモネラ症、その他の腸感染症の臨床検査に使用されます。 エオシンとメチレンブルー寒天は、1916 年に J. E. Holt-Harris と O. Teague によって初めて提案されましたが、その後、1918 年に Lewin によって培地の組成が変更されました。

L.S. 腸内細菌用の他の固形鑑別診断用栄養培地と同様に、研究室で広く使用されています。 練習する。 その助けを借りて、比較的高い割合の症例で病原性乳糖陰性微生物叢を検出することが可能です。 レディHP 非常に安定しており、光の下や数日間保管しても特性が変化しません。 その製造には、水素イオン濃度 (pH) を正確に測定する必要はありません。 HPの構成に含まれています。 有機染料はグラム陽性菌の増殖を選択的に阻害します。そのため、有機染料は濃縮培地として機能し、たとえ試験材料に含まれる病原性細菌が比較的少数であっても、試験材料に直接接種した場合に比較的良好な結果が得られます。

個々の成分（ペプトンと特に染料）の品質に応じて、結果として得られるHP。 結果は多少異なる可能性があるため、新しい一連の培地を準備する際には、コロニーの認識が非常に容易になる同じブランドの材料を使用することをお勧めします。

ＨＰを調製するためのいくつかのレシピおよび方法が知られている。 （Yu.A.コズロフ、G.Ya.シナイ、O.G.ビルガーなど）。 最も広く使用されている方法は、基本培地、乳糖溶液、色素を別々に調製し、将来の使用に備えて保存し、使用前に混合する方法です。

基本培地は、細菌ペプトン 10 g、寒天 15 g、リン酸二カリウム (K2HPO4) 2 g、および蒸留水 1 リットルで構成されます。 オートクレーブで1気圧で15〜20分間滅菌され、pHは調整されません。

差分培地を調製する場合、溶融した基本培地 100 ml ごとに、絶えず撹拌しながら、蒸留水で調製し、蒸気流で事前滅菌した以下の溶液を加えます（分割して、3 日連続で各 15 ～ 20 分間）。所定の順序：医療用乳糖の20％溶液5ml、2％アルカリ性エオシン溶液（細菌学的）2ml、0.5％メチレンブルー溶液1.5ml。 調製した培地をペトリ皿に注ぎ、軽く乾燥させて通常どおり使用します。 媒体の色は青紫です。

L. p 上の大腸菌のコロニー 小さく、丸く、表面は滑らかで光沢があり、色は濃い青（黒）で、時には金属光沢があります。 若いコロニーは曇っていて不透明で、中心部のみが着色されています。 赤腸、腸チフス、パラチフスの病原体のコロニーは比較的小さく、丸く、光沢があり、透明で、通常は完全に無色（若い）、またはわずかにピンク色または青みがかっています。 プロテアのコロニーは忍び寄る成長をしません。 それらは小さく、孤立しており、色はオレンジがかった黄色です。 培地はプロテア コロニーの周囲のみ色を変えます。

一部の著者は、0.5% メチレンブルー溶液の量を基本培地 100 ml あたり 2 ml に増やすか、その組成からリン酸緩衝液を除去することを推奨しています。 ペプトンではなく、ホッティンガーのダイジェストに基づいて、適量の寒天とリン酸カリウムを加えて pH 7.2 ～ 7.3 で培地を調製できます。 培地の調製に肉水を使用することは容認できません。この場合、コロニーの分化は著しく悪化します。

乾燥HPを調製するための既知の方法があり、それは品質が非常に安定しており、長期保存や遠征作業の条件下で特に便利です（N.V. Ploskirev）。

安定したドライHP。 業界によって作成されている場合、その製造と使用に関する説明書が媒体と一緒に送信されます。 ほとんどの診断研究所では、病原性腸内細菌の分離と分別のために、国産の高品質の標準選択乾燥栄養培地、つまり L. s.、Bacto-agar F、Ploskirev 培地 (Ploskirev 培地を参照) を使用しています。

参考文献: 感染症の微生物学的診断ガイド、編。 K. I. Matveeva、p。 110、M.、1973年。 微生物学的およびウイルス学的研究方法のハンドブック、編。 M.O.ビルガー、p. 58、M.、1973年。 Levine M. エオシン-メチレンブルー寒天上での腸内細菌の分化に対する色素の濃度の影響、J. Bact.、v. 45、p. 471年、1943年。

G.P.ベリコフ。

乾燥培地 40 g を精製水 1 リットルに混合し、沸騰させ、寒天が完全に溶けるまで煮沸（2 ～ 3 分）し、綿ガーゼフィルターでろ過し、滅菌瓶に注ぎ、滅菌します。 112℃の温度で20分間オートクレーブ処理することにより。 滅菌培地を 45 ～ 48°C の温度に冷却し、滅菌ペトリ皿に注ぎます。 寒天が固まったら、37℃の温度で40～60分間乾燥させます。 完成した媒体の色は赤みがかったレンガになるはずです。

使用前に、調製した培地は暗所で 2 ～ 8°C の温度で 7 日間以内に保存できます。

接種した試験サンプルを 37°C の温度で 18 ～ 48 時間インキュベートし、コロニーの有無および外観に基づいて視覚的な増殖を制御します。 乳糖陽性微生物は、金属光沢の有無にかかわらず、薄紫色から紫色までの不透明なコロニーを形成します。 乳糖陰性微生物は、無色透明または半透明のコロニーを形成します（淡いピンク色のコロニーを形成する場合もあります）。

有効期限が切れた乾燥培地および使用済みの既製培地の廃棄 - 医療機関からの廃棄物の収集、保管、および廃棄に関する SanPiN 2.1.7.728-99 規則の要件に従って。